1
00:00:04,000 --> 00:00:08,009
Hai, nama saya Paul Offit. Saya dari Rumah Sakit Anak Philadelphia dan Sekolah

2
00:00:08,009 --> 00:00:12,005
Kedokteran Perelman di Universitas Pennsylvania.

3
00:00:12,005 --> 00:00:16,001
Yang akan saya bicarakan pada perkuliahan ini adalah vaksin rotavirus.

4
00:00:16,001 --> 00:00:19,369
Dan kita hanya akan membahas mengenai satu vaksin ini dalam seluruh kuliah ini.

5
00:00:19,369 --> 00:00:22,928
Dan ini bukan karena saya rasa rotavirus merupakan vaksin yang penting,

6
00:00:22,928 --> 00:00:26,085
tetapi karena saya merasa beruntung untuk menjadi bagian

7
00:00:26,085 --> 00:00:29,893
dari tim yang mengembangkan vaksin ini di Rumah Sakit Anak.

8
00:00:29,893 --> 00:00:35,038
Saya melihatnya dari riset awal dan perkembangannya dan

9
00:00:35,038 --> 00:00:38,757
secara mendasar dari awal hingga akhir dan ini merupakan proses edukasi bagi saya.

10
00:00:38,757 --> 00:00:41,992
Dan menurut saya, akan menjadi sangat menyenangkan untuk melalui cerita ini.

11
00:00:41,992 --> 00:00:51,002
Rotavirus merupakan virus yang menginfeksin usus kecil dan menyebabkan demam, muntah

12
00:00:51,002 --> 00:00:54,065
dan dehidrasi pada anak kecil.

13
00:00:54,065 --> 00:00:58,790
Ini merupakan studi yang dilakukan oleh Bill Rodriguez pada Rumah Sakit Anak di Washington DC.

14
00:00:58,790 --> 00:01:02,875
Dia melihat ritavirus dan membandingkannya dengan virus lainnya penyebab sakit perut,

15
00:01:02,875 --> 00:01:09,855
dan menemukan bahwa rotavirus mampu untuk menyebabkan mntah dan dehidrasi.

16
00:01:09,855 --> 00:01:15,346
Dan ini sebabnya ketika anda memiliki virus flu perut, anda akan kehilangan cairan ketika anda dehidrasi,

17
00:01:15,346 --> 00:01:19,288
ketika anda diare, ketika demam dan

18
00:01:19,288 --> 00:01:22,086
sulit untuk mengisi kembali cairan tubuh anda ketika anda muntah.

19
00:01:22,086 --> 00:01:26,005
Ini adalah tiga hal yang terjadi secara cepat dan berujung kepada dehidrasi dan

20
00:01:26,005 --> 00:01:29,001
dapat membuat penderita harus dirawat di rumah sakit dan mati.

21
00:01:30,539 --> 00:01:40,154
Ini adalah bagian yang diwarnai dari usus kecil menunjukkan virus yang menginfeksi usus.

22
00:01:40,154 --> 00:01:43,099
Anda dapat melihat disini bahwa

23
00:01:45,638 --> 00:01:52,594
jika anda melihat proyeksi yang seperti jari, yang dinamakan villi, dalam usus kecil.

24
00:01:52,594 --> 00:01:56,453
Anda dapat melihat bahwa virus menginfeksi sel-sel yang terdeteksi

25
00:01:56,453 --> 00:02:01,184
yang dinamakan sel epitel dewasa yang ada dalam usus.

26
00:02:01,184 --> 00:02:05,124
Ini yang dilakukan rotavirus. Mereka menginfeksi sel ini, dan merusak sel tersebut,

27
00:02:05,139 --> 00:02:09,971
dan mereka membuatnya sulit untuk menyerap air.

28
00:02:09,971 --> 00:02:14,677
Hal ini menyebabkan diare, muntah dan dehidrasi.

29
00:02:15,031 --> 00:02:20,270
Setiap tahun di Amerika Serikat, sebelum vaksin tersebut dilisensikan dan dipergunakan,

30
00:02:20,285 --> 00:02:27,447
yaitu pada tahun 2006, penderita rotavirus mencapai 2,7 juta orang, melibatkan 500.000 kunjungan ke dokter,

31
00:02:27,447 --> 00:02:34,528
270.000 kunjungan ke gawat darurat, 70.000 rawat inap dan 20-60 kematian per tahun.

32
00:02:34,528 --> 00:02:38,167
Jika anda berasumsi mengenai jumlah, sekitar 3,5 dan 4 juta andak setiap tahunnya di Amerika Serikat,

33
00:02:38,167 --> 00:02:42,482
berarti 1 dari 50 anak yang lair di Amerika Serikat, akan dibawa ke rumah sakit

34
00:02:42,482 --> 00:02:45,509
dengan dehidrasi yang merupakan kondisi infeksi rotavirus.

35
00:02:45,509 --> 00:02:50,131
Jumlah ini menurun pesat sejak vaksin ini ada. Dan kita akan membicarakannya.

36
00:02:51,239 --> 00:02:58,071
Pada negara berkembang, rotavirus adalah pembunuh. Tercatat sekitar 500.000 kematian per tahunnya.

37
00:02:58,071 --> 00:03:04,308
Ini berarti 2000 anak menunggal setiap hari karena virus ini, dari dehidrasi yang disebabkan oleh virus.

38
00:03:04,308 --> 00:03:08,869
Sebenarnya, ini ,erupakan agen tunggal. Ini merupakan salah satu pembunuh bayi dan balita di dunia.

39
00:03:08,869 --> 00:03:11,006
Dan karena alasan tersebut, ada ketertarikan yang luar biasa

40
00:03:11,006 --> 00:03:14,603
baik dari pemerintah atau swasta untuk mengembangkan vaksin untuk mencegahnya.

41
00:03:15,757 --> 00:03:22,282
Ide awal untuk membuat vaksin, menggunakan pendekatan yang mirip dengan milik Edward Jenner.

42
00:03:22,340 --> 00:03:26,001
Saya telah membahas Edward Jenner pada kuliah sebelumnya, dalam sejarah vaksin.

43
00:03:26,001 --> 00:03:30,408
Tetapi ide awalnya adalah bahwa setiap mamalia yang hidup

44
00:03:30,408 --> 00:03:33,559
di muka bumi memiliki rotavirus mereka sendiri,

45
00:03:33,559 --> 00:03:35,986
kenapa kita tidak melakukan hal yang sama dengan yang dilakukan Edward Jenner?

46
00:03:35,986 --> 00:03:41,235
Ingat, Edward Jenner menggunakan virus cacr sapi untuk melindungi dari cacar manusia.

47
00:03:41,235 --> 00:03:47,270
Dia tidak tahu bagaimana, tetapi kita sekarang tahu bahwa cacar sapi hampir sama dengan

48
00:03:47,270 --> 00:03:53,003
cacar manusia, infeksi yang dilakukan oleh satu jenis, dapat melindungi dari jenis lainnya.

49
00:03:53,003 --> 00:03:55,840
Kita menggunakan hal yang sama disini,

50
00:03:55,840 --> 00:04:02,006
mengapa kita tidak menggunakan strain rota-virus yang bukan berasal dari manusia, untuk melindungi dari rotavirus manusia?

51
00:04:02,006 --> 00:04:07,541
Ini adalah spesies yang dapat terinfeksi oleh rotavirus.

52
00:04:08,157 --> 00:04:13,326
Tetapi batasan spesiesnya terlalu tinggi, berarti bahwa benar, untuk cacar,

53
00:04:13,326 --> 00:04:18,003
cacar sapi dapat menyebabkan penyakit pada sapi, tetapi tidak pada manusia,

54
00:04:18,003 --> 00:04:24,667
dan cacar manusia dapat menyebabkan penyakit pada manusia, tetapi bukan sapi. Hal ini juga berlangsung disini.

55
00:04:24,667 --> 00:04:31,615
Contoh, rotavirus sapi dapat menyebabkan muntah dan diare parah pada sapi,

56
00:04:31,615 --> 00:04:37,754
tetapi tidak berpengaruh apa-apa pada manusia. Dan sebaliknya, rotavirus manusia tidak menyebabkan penyakit pada sapi.

57
00:04:37,754 --> 00:04:43,162
Jadi, batasan spesies yang sangat tinggi dan ini merupakan ide aslinya.

58
00:04:43,162 --> 00:04:48,058
Yang terjadi disini adalah ada sebuah kelompok di National Institute of Health

59
00:04:48,058 --> 00:04:54,253
yang dikepalai Al Kapikian, Rob Chanock, Taka Hoshino, Harry Greenberg, Jorge Flores dan lainnya;

60
00:04:54,253 --> 00:05:01,253
yang memperhatikan strain bernama RRV. Strain tersebut berarti Resist Rotavirus.

61
00:05:01,253 --> 00:05:07,084
Ini merupakan virus, strain rotavirus yang diisolasi dari seekor monyet di California Utara pada tahun 1980an

62
00:05:07,084 --> 00:05:17,670
oleh H. Milerby. Virus ini lalu dimurnikan dengan mengembangkannya pada kultur sel, dan sedikit dilemahkan.

63
00:05:17,670 --> 00:05:21,048
Idenya adalah bahwa virus tersebut dapat dilemahkan di manusia karena ii bukanlah virus manusia.

64
00:05:21,064 --> 00:05:22,838
Ini mirip dengan ide yang dimiliki Edward Jenner.

65
00:05:22,838 --> 00:05:26,862
Dan ketika vaksin tersebut diberikan kepada anak berumur 2, 4, dan 6 bulan

66
00:05:26,862 --> 00:05:29,559
di Swedia dan Finlandia, itu berhasil.

67
00:05:29,559 --> 00:05:34,823
Hal ini melindungi mereka dari dehidrasi sedang hingga parah

68
00:05:34,823 --> 00:05:39,004
seperti yang terlihat pada dua baris pertama slide.

69
00:05:39,004 --> 00:05:43,708
Tetapi ketika vaksin tersebut diuji di Rochester, New York untuk percobaan, vaksinnya tampak tidak bekerja.

70
00:05:43,708 --> 00:05:49,959
Jadi, saya rasa yang orang simpulkan setelah rangkaian percobaan ini bahwa virus bukan dari manusia dalam hal ini virus monyet,

71
00:05:49,959 --> 00:05:55,708
secara tidak konsisten mampu untuk melindungi dari penyakit rotavirus manusia.

72
00:05:56,523 --> 00:06:02,019
Sekarang kami bekerja, dan dengan kami, saya maksud Stanley Plotkin dan Fred Clark, yang memimpin program ini;

73
00:06:02,019 --> 00:06:07,594
bekerja pada rumah sakit anak, Philadelphia; dengan sebuah strain bernama WC3.

74
00:06:07,594 --> 00:06:13,223
Strain ini diambil dari anak sapi yang diare pada fasilitas Kenneth Square

75
00:06:13,223 --> 00:06:16,785
yang merupakan fasilitas kedokteran hewan terbesar di Universitas Pennsylvania.

76
00:06:16,881 --> 00:06:20,685
Dan kita melihat pada virus tersebut dan kita kembali ke Institut Wistar

77
00:06:20,685 --> 00:06:23,664
dan memurnikannya melalui kultur sel.

78
00:06:23,664 --> 00:06:29,669
Karena datang dari anak sapi ketiga yang kami tes, maka dinamakan WC3 atau Wistar Calf Three.

79
00:06:29,669 --> 00:06:35,594
Kami memberikan virus tersebut secara oral pada anak berumur 2,4,dan 6 bulan di Philadelphia

80
00:06:35,594 --> 00:06:38,685
dan hasilnya dapat melindungi dari penyakit menengah hingga yang parah

81
00:06:38,685 --> 00:06:42,786
dan sangat baik untuk melindungi dari penyakit yang disebabkan rotavirus.

82
00:06:42,786 --> 00:06:47,008
Tetapi kita lalu menguji vaksin tersebut di Cincinnati atau Bangui di Republik Afrika Tengah,

83
00:06:47,008 --> 00:06:52,002
dan menemukan bahwa vaksin tersebut tidak berjalan dengan baik. Pada dasarnya apa yang kami temukan

84
00:06:52,002 --> 00:06:56,003
dengan strain anak sapi sebenarnya sama dengan apa yang peneliti NIH temukan

85
00:06:56,003 --> 00:07:00,002
dengan strain simian, sebuah strain monyet. Bahwa perlindungan dari rotavirus dapat terjadi pada

86
00:07:00,002 --> 00:07:04,003
strain yang berasal bukan dari manusia, tetapi tidak konsisten dalam kemampuannya untuk melindungi.

87
00:07:04,003 --> 00:07:08,006
Hal ini membuat kami kembali ke awal. Slide ini menunjukkan bagaimana

88
00:07:08,006 --> 00:07:13,000
awalnya. Kami ingin memutuskan protein rotavirus mana yang bertanggung jawab

89
00:07:13,000 --> 00:07:17,003
untuk membangkitkan virus, khusus untuk menetralkan antibodi. Dengan kata lain,

90
00:07:17,003 --> 00:07:21,007
protein rotavirus apa yang mengeluarkan imun pelindung dan protein rotavirus mana

91
00:07:21,007 --> 00:07:26,000
yang bertanggung jawab atas kejahatan virus. Ini adalah cara anda membuat vaksin apapun.

92
00:07:26,000 --> 00:07:30,000
Anda mencoba untuk memisahkan bagian pertama, dalam hal ini, virus yang

93
00:07:30,000 --> 00:07:34,002
patogen, bahwa penyakit in disebabkan oleh virus

94
00:07:34,002 --> 00:07:38,001
yang menyebabkan imun respon yang melindungi. Berharap bahwa

95
00:07:38,001 --> 00:07:42,004
gen yang bertanggung jawab untuk membuat protein yang menyebabkan penyakit berbeda dengan

96
00:07:42,004 --> 00:07:46,008
yang ada di gen yang dibutuhkan untuk membuat protein

97
00:07:46,008 --> 00:07:51,000
yang memicu respon imun. Hany asedikit pengantar mengenai struktur vaksin rotavirus,

98
00:07:51,000 --> 00:07:56,000
kartun partikel rotavirus ditampilkan di bagian kanan dan ada dua protein yang

99
00:07:56,000 --> 00:08:00,008
perlu diperhatikan. Yang pertama bernama VP4 merupakan kepanjangan dari

100
00:08:00,008 --> 00:08:05,006
Viral Protein Four. Ini merupakan protein viral yang bertanggung jawab untuk

101
00:08:05,006 --> 00:08:10,004
mengikat dengan sel sebelum menginfeksinya. Ini juga disebut sebagai Protein P,

102
00:08:10,004 --> 00:08:15,001
atau serotype P dan anda kana melihat maksud saya beberapa saat lagi, P karena hal ini sangat sensitif untuk

103
00:08:15,001 --> 00:08:20,000
protease. Protease adalah protein yang membelah protein lainnya.

104
00:08:20,002 --> 00:08:24,006
Dan ini, dalam urutan memasuki sel, bahwa VP4 butuh

105
00:08:24,006 --> 00:08:29,000
diikat dengan dua protein yang lebih kecil bernama VP5 dan VP8. Protein mati lainmya yang difokuskan

106
00:08:29,000 --> 00:08:33,005
bernama VP7, yang merupakan singkatan dari Viral Protein 7. Ini merupakan protein

107
00:08:33,005 --> 00:08:37,005
selubung, yang berada pada permukaan virus. Ini merupakan

108
00:08:37,005 --> 00:08:41,009
gliko-protein, yang dinamakan pula Protein G. Saya akan membicarakannya sebebntar lagi;

109
00:08:41,009 --> 00:08:46,003
jadi, ada dua protein permukaan, VP4 dan VP7

110
00:08:46,003 --> 00:08:50,001
dan sebagai peraturan umum ketika anda mencoba untuk berlindung dari infeksi virus, anda akan mencoba

111
00:08:50,001 --> 00:08:54,003
antobodi dari permukaan virus; begitu pula dengan ini, dari permukaan bakteri.

112
00:08:54,003 --> 00:08:58,003
Karena hal ini akan melindungi dari virus atau bakteri dari mengikat dirinya dengan sel, memasukinya

113
00:08:58,003 --> 00:09:02,006
dan menyebabkan penyakit. Ini merupakan semacam pengetahuan umum mengenai vaksin. Pada banyak

114
00:09:02,006 --> 00:09:07,008
waktu, anda mencoba untuk mencegah sel virus untuk mengikat.

115
00:09:07,008 --> 00:09:14,002
Genome rotavirus mengandung 11 segmen RNA ganda terpisah.

116
00:09:14,002 --> 00:09:20,009
Dan jika anda melihat kolom A, jika anda mengambil virusnya

117
00:09:20,009 --> 00:09:26,000
dan menghancurkannya dengan deterjen dan lalu meletakkannya di atas

118
00:09:26,000 --> 00:09:31,004
gel poly-acrylamide yang hanya merupakan jala plastik dan lalu anda mengmbil virusnya

119
00:09:31,004 --> 00:09:36,009
dan menjalankannya pada arus listrik. Anda dapat memisahkan segmen individu

120
00:09:36,009 --> 00:09:42,003
RNA ganda tersebut berdasarkan ukuran. Anda dapat melihat electropherotype dari

121
00:09:42,003 --> 00:09:46,007
virus A. Virus A dan virus B berbeda.

122
00:09:46,007 --> 00:09:51,003
mereka merupakan strain yang berbeda, oleh karena itu, mereka memiliki cara yang berbeda dalam migrasi segmen RNA ganda tersebut

123
00:09:51,003 --> 00:09:56,000
pada gel tersebut. Sekarang, jika anda melihat dua

124
00:09:56,000 --> 00:09:59,093
virus dan anda menginfeksi sel pada saat yang sama,

125
00:09:59,093 --> 00:10:04,002
anda akan melihat bahwa 20% dari seluruh keturunan virus yang dihasilkan

126
00:10:04,002 --> 00:10:08,005
merupakan virus yang berbeda-beda. Dengan kata lain, mereka merupakan gabungan dari dua virus.

127
00:10:08,005 --> 00:10:12,009
Anda dapat melihat stain virus pada bagian kanan mendapatkan semua gen nya dari

128
00:10:12,009 --> 00:10:17,008
virus A, dan hanya satu gen dari virus B.

129
00:10:17,008 --> 00:10:22,006
Jika virus A dan B berbeda dalam kapasitas mereka untuk menyebabkan penyakit pada hewan percobaan,

130
00:10:22,006 --> 00:10:27,002
pada kasus ini, kita melihat tikus, lalu anda dapat mencari genetis racunnya.

131
00:10:27,002 --> 00:10:31,005
Jika kedia strain tersebut berbeda dengan memperhitungkan mengenai kemampuan mereka untuk

132
00:10:31,005 --> 00:10:36,005
menetralisir antibodi dalam serum, maka anda dapat menemukan

133
00:10:36,005 --> 00:10:41,006
genetik dari serotipe yang dapat membuat anda membedakan virus-virus tersebut berdasarkan

134
00:10:41,006 --> 00:10:46,004
kemampuan mereka untuk menimbulkan antibodi yang akan menetralisir strain atau serotipe tertentu.

135
00:10:46,004 --> 00:10:50,008
Dan sekali lagi, dengan membuat